生化检测丨溴甲酚绿法测定血清白蛋白

4543 人阅读发布时间：2024-02-04 09:21

溴甲酚绿法

血清白蛋白溴甲酚绿法的原理是基于白蛋白与溴甲酚绿形成复合物的特性。在pH4.2的缓冲液中，白蛋白作为一种阳离子，可以与阴离子染料溴甲酚绿（BCG）发生结合反应，形成蓝绿色的化合物。

这种复合物在波长630nm处有吸收峰，即在该波长下能够吸收特定的光线。吸光度的大小与溶液中白蛋白的浓度成正比例关系。因此，通过测量溶液在630nm波长处的吸光度，可以推算出血清中白蛋白的含量。

一、测定方法

1、样品处理：将实验室用具和试剂消毒并清洗干净。取一定量的血清样品，通常是10-20μL。

2、加入试剂：将样品加入含有溴甲酚绿的试剂管中，溴甲酚绿与白蛋白形成复合物，溶液颜色由绿色变为蓝色。

3、反应：将试剂管放入恒温水浴中，温度一般为37℃，反应一段时间（一般为5-10分钟）。

4、读取吸光度：使用分光光度计读取试剂管中溶液的吸光度值，通常在595nm波长处测量。

5、计算白蛋白浓度：根据标准曲线或计算公式，将吸光度值转换为白蛋白的浓度。

二、注意事项

1、实验证明BCG不仅与白蛋白显色，还与其他蛋白成分显色，其中球蛋白、转铁蛋白和融珠蛋白的反应更为显著。建议使用定值参考血清作为标准，以比较理想的结果。BCG与血清特异结合后，可在30秒内读取吸光度，可以明显减少非特异性结合反应。

2、当60g/L白蛋白标准与BCG结合后，在1.0cm光程下测定的吸光度为0.811±0.035。如果测定结果达不到此值，表示灵敏度较差。

3、使用此方法测定正常血清标本时，批间异系数约为-6.3%左右。

参考文献：

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[2]贝克曼库尔特DXC800全自动生化分析仪MC白蛋白模块溴甲酚紫法与溴甲酚绿法检测的比对 [J] . 陈龙峰 ,林少荣 ,陈曼娜 . 医学检验与临床 . 2014,第003期

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资料格式：

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