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技术资料/正文
生化检测丨胆红素检测
2715 人阅读发布时间：2024-02-01 16:32
胆红素
胆红素主要来自血中衰老的红细胞。当衰老的红细胞释放出血红蛋白后，这些血红蛋白会在体内经过一系列的代谢过程，最终转化为胆红素。在正常的情况下，血液中只含有少量的胆红素。
血清胆红素测定是肝、胆功能检查中一项非常重要的检测项目。通过测定血清中的胆红素含量，可以了解肝脏和胆囊的健康状况，帮助诊断和监测相关疾病的发展情况，如黄疸、肝炎、肝硬化等疾病。
一、测定方法
（一）、重氮盐法
血清中的结合胆红素可以直接与重氮试剂反应生成偶氨胆红素，因此被称为直胆或1min胆红素测定。
而非结合胆红素测定时，需要加入苯甲酸钠作为加速剂来破坏胆红素的氢键，然后再与重氮试剂反应。抗坏血酸会破坏剩余的重氨试剂，而碱性酒石酸钠的加入会使最大吸光度从530nm转移到598nm。这样可以将非胆红素的黄色色素以及其他红色和棕色色素产生的吸光度降至可以忽略不计的程度，从而提高灵敏度和特异性。
最终形成的绿色色素是由兰色的碱性偶氮胆红素对氨基苯磺酸之间形成的黄色色素混合而成。
（二）、钒酸盐氧化法
钒酸盐氧化法测定胆红素的原理是利用氧化剂钒酸钠在一定条件下将胆红素氧化成胆绿素。
在pH3左右的环境下，有表面活性剂和加速剂的存在下，样品中的总胆红素被氧化剂钒酸钠氧化为胆绿素。通过测定氧化前后的吸光度的变化，可以计算出样品中胆红素的含量。
二、注意事项
1、本方法在10-37℃的温度范围内进行测定，温度的变化对测定结果没有显著影响。
2、在使用叠氮钠作为防滴剂的质控血清时，可能由于叠氮钠的存在干扰了胆红素与重氮试剂的反应导致偶氮反应不完全甚至不显色。因此，在使用质控血清进行实验时，需要注意这种潜在的干扰。
3、胆红素对光敏感，因此在进行测定时，标准品和待测样本都应尽量避免暴露在光线下。
参考文献：
[1]血清总胆红素重氮法和钒酸盐氧化法测定方法的评价 [J] . 孙虹 ,王建琼 ,刘琳 . 国际检验医学杂志 . 2006,第007期
[2]重氮法与钒酸盐氧化法测定总胆红素的方法学比较 [J] . 肖洪广 ,李秋明 ,郑君德 . 中国实用医药 . 2009,第024期
[3]用MTAB直接重氮盐法测定血清总胆红素[J].丁玉珠,张有为.检验医学,2003,第018期