特殊染色丨尼氏染色

尼氏染色法（Nissl Staining）是一种用碱性染料染色神经组织的方法。尼氏体是存在于细胞质中的一种嗜碱性物质，在各种神经元中广泛分布。不同神经元中的尼氏体在形状、大小和数量上都有所差异。

尼氏染色法可以染出尼氏体，以观察神经元内的细胞结构，并通过观察尼氏体来了解神经元的损伤情况。常用于尼氏染色的碱性染料包括焦油紫、亚甲蓝、甲苯胺蓝和硫堇等。

1、脱水包埋：新鲜组织固定于10%中性福尔马林溶液中固定48小时后，进行常规脱水包埋。

2、切片脱蜡：切片厚度控制在6-8μm，然后进行常规脱蜡至水，用蒸馏水进行冲洗。

3、染色：将切片放入Toluidine blue染料中，将染色缸放置于恒温箱中，温度为50-60°C，侵染25-50分钟。用蒸馏水稍作冲洗。

4、分化：将切片放入70%乙醇中进行冲洗，迅速将切片放入95%乙醇中进行分化。分化过程难以控制，如果分化失败，可以重复步骤3。

5、脱水封固：迅速将切片放入无水乙醇中进行脱水，用二甲苯进行透明处理，然后使用中性树胶进行封固。在显微镜下观察切片，并进行拍照。

尼氏染色实例

1、尼氏体离体后容易溶解，因此在取出组织后应立即进行固定，以免导致难以染色。

2、染色后的标本需要避光保存，以防止染色物质的褪色。

参考文献：

[1]基于尼氏染色图谱的小型啮齿动物快速脑区定位方法 [J] . 王明娟 ,朱青青 ,潘永良 . 野生动物学报 . 2020,第004期

[2]Unna氏多色性美蓝染液用于兔脑尼氏体染色 [J] . 胡满 ,张海旺 ,刘晓丹 . 河北北方学院学报：自然科学版 . 1999,第003期

[3]三种尼氏小体染色方法对放疗后犬脊髓神经元显示效果的比较 [J] . 锡林宝勒日 ,徐万龙 ,白靖平 . 实用医学杂志 . 2010,第012期

[4]定量研究尼氏染色鼠脑内细胞数量的方法初探 [A] . 孟云龙 . 2014