结肠直肠癌动物模型

诱导型

诱发性肿瘤动物模型指的是，在实验条件下，人为地运用各种致癌因素(carcinogens)，通过口服、注入、埋藏和涂抹等方式，诱发动物发生肿瘤的动物模型。由于诱发因素和条件可人为控制，诱发率远高于自然发病率，故在肿瘤实验研究中优于自发瘤。

该类模型制备成功的概率主要取决于给药的剂量、频率、途径、持续时间以及性别、周龄、遗传背景等，同时肠道菌群、饮食、免疫状态等可通过干扰致癌剂代谢来影响局部有效浓度。

诱发性肿瘤动物模型制作方法相对简单，重复性好，可以在较短时间内大量复制，而且基本模拟癌变的过程，因此，在实验中应用较广。

但是，由于诱发性肿瘤实验因存在环保问题而需防护设施，实验条件要求较高。

诱发型结直肠癌模型多采用化学诱发途径，目前，常用的结肠癌化学诱导剂有二甲基肼(dimethylhydrazine,DMH)、氧化偶氮甲烷(azoxymethane,AOM)及致炎剂葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodiuln, DSS)等。

（1）二甲基肼(dimethylhydrazine，DMH)诱导法

造模机制：DMH本身并不致癌，需经氧化脱烷基才具有致癌作用。DMH在肝细胞内质网被氧化成甲基氧化偶氮甲醇，与β-葡萄糖醛酸结合，一部分经尿排出，一部分随胆汁进入肠腔，在肠道细菌和肠黏膜上皮β-葡萄糖苷酸酶的作用下，甲基氧化偶氮甲醇重新游离，成为肠道终末致癌物并最终引起结直肠上皮癌变。

造模方法：将DMH用生理盐水配制成浓度为4mg/ml的溶液，用1mol/LNaHCO3溶液或0.1mol/LNaOH溶液调pH为6.5，用0.22μm微孔滤器过滤除菌后腹腔注射，每次剂量21mg/kg，每周1次，连续20周。

该造模方法的结直肠癌诱发率达到81-100％，诱发的肿瘤均为恶性肿瘤，绝大多数为腺癌。

（2）氧化偶氮甲烷(azoxymethane，AOM) 诱导法

造模机制：AOM是DMH在肝脏的代谢产物，作用过程与DMH相似，它通过DNA烷化，促进碱基的错误配对而致癌。

造模方法：AOM用生理盐水配制成浓度为1.25g/L溶液，选用6周龄雌性ICR小鼠，10mg/kg体重，腹腔注射，每周1次，连续4周，以肿瘤发生为观察终点。

模型特点：

• 比DMH致癌作用更强，使用剂量稳定。
• AOM诱导小鼠大肠癌的发生是一个长期的多阶段的过程，与人类大肠癌发生过程中细胞动力学病理组织学和分子特征方面的变化特点非常相似。

由于AOM相比DMH具有致癌作用稳定、高效的特点，现正被越来越多的研究者采用。

Tips：不同的致癌剂最佳剂量取决于实验动物遗传背景和给药方式。不同遗传背景小鼠对AOM的敏感程度不同，敏感性由强到弱的顺序为：BALB/C小鼠与ICR小鼠有相同的作用，对氧化偶氨甲烷最敏感，C57BL/6N小鼠其次。

DMH法和AOM法，模型制备简单，造模时间短，成瘤率高，肿瘤的发生部位、组织学类型以及肿瘤的发生过程均与人类直肠癌十分相似，可以较好地模拟人体直肠癌发生发展的实验研究，不过缺少人结直肠癌的前期腺瘤和后期易转移的特征。