HE染色丨骨组织脱钙

在检验工作中，实验室经常遇到钙化、骨化标本或骨肿瘤标本。由于该类组织里存在钙盐，妨碍用常规方法制作良好切片。骨组织及钙化病灶，经过固定后，必先将钙盐除去使组织软化，才能进行常规切片。如脱钙不全则切片易撕开或碎裂并损伤切片刀刃。脱去钙盐的过程，称为脱钙。

本篇文章将列出关于病理组织如何脱钙的注意事项和步骤：
 

1、骨组织固定24小时后，锯下不超过0.5mm厚度的薄骨片，然后再用10%甲醛溶液固定后进行脱钙。（未固定的组织在酸性脱钙液中受到的损伤比已固定的组织大3倍）。如果骨组织过厚，则需要延长脱钙时间，但长时间浸泡在强酸中会影响切片的染色效果。

2、在不影响诊断条件下，应将骨组织周围的软组织全部去除。如果切片的目的是观察骨髓病变或骨组织肿瘤，最好除去一部分正常的致密骨组织，以便于脱钙和制片。

3、脱钙要彻底，脱水应充分，在脱水过程中要注意不使其过度硬化。
 

1、取材：将骨组织固定在10%甲醛溶液中24小时后，锯取厚度约为0.5cm的骨片。

2、固定：再用10%甲醛溶液固定2天。

3、软化：将组织放入脱钙剂中，每天更换新鲜液，直到组织软化为止。

4、除酸：流水冲洗24小时（除酸）。

5、切片：进行常规脱水、透明、浸蜡和切片。
 

针刺鉴定：目前实验室最常用的检验方法是——针刺。如果很容易被刺透，而且不感到阻力，说明组织基本上脱钙完全，否则应继续脱钙。