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技术资料/正文
前列腺癌动物模型
263 人阅读发布时间：2024-04-29 14:44
一、实验准备
雄性BALB / c裸鼠10只，6 wk龄，体质量20 g左右，均在SPF条件下层流架内饲料饮水自由摄入。 Du145细胞系用含100 mL /L胎牛血清(杭州四季青公司)的RPM I 1640培养液(美国Gibco公司)在37℃，50 mL /L CO2 的孵箱内培养，以1. 25 g/L胰酶和0. 2 g/L EDTA的混合液消化传代。
二、具体操作
1. 裸鼠用10 g/L麻醉剂( 75 mg/kg)麻醉，仰卧位，胶带固定四肢，下腹部正中横切口1 cm，暴露膀胱和精囊腺，用棉签轻压膀胱顶壁、腹侧壁，并向下游离至膀胱颈,推开肌肉及生殖腺进一步暴露前列腺，可见其大小约1. 0 mm ×1. 5 mm ×2. 0 mm，分左右2叶，呈粉红色，有明显的腺体组织特征。
2. 用1 mL TB 针筒、29G针头轻轻挑起一侧前列腺包膜，缓慢进针，直至顶起对侧包膜，明确针尖进入包膜后，再缓慢推注Du145细胞悬液50 μL (6 ×106 个) ，以包膜向上鼓起,脱离腺体表面为满意标准。
3. 恢复脏器的解剖位置，用720可吸收线分别间断缝合腹壁肌肉层和皮肤层,待鼠苏醒后回笼。
4. 以裸鼠出现恶液质、处于濒死状态作为观察终点，颈椎脱臼法处死。
5. 尸解并观察荷瘤部位肿瘤的生长情况。
6. 裸鼠处死后，立即在100 mA，40 kV，5. 23 ms条件下行X线检查。
7. 裸鼠与球管距离为1. 0 m，然后取前列腺、膀胱、盆腔淋巴结、肝脏和肺脏标本， 40 g/L 甲醛固定、石蜡薄层切片4 μm， HE染色后光镜下观察有无转移灶。
雄性BALB / c裸鼠10只，6 wk龄，体质量20 g左右，均在SPF条件下层流架内饲料饮水自由摄入。 Du145细胞系用含100 mL /L胎牛血清(杭州四季青公司)的RPM I 1640培养液(美国Gibco公司)在37℃，50 mL /L CO2 的孵箱内培养，以1. 25 g/L胰酶和0. 2 g/L EDTA的混合液消化传代。
二、具体操作
1. 裸鼠用10 g/L麻醉剂( 75 mg/kg)麻醉，仰卧位，胶带固定四肢，下腹部正中横切口1 cm，暴露膀胱和精囊腺，用棉签轻压膀胱顶壁、腹侧壁，并向下游离至膀胱颈,推开肌肉及生殖腺进一步暴露前列腺，可见其大小约1. 0 mm ×1. 5 mm ×2. 0 mm，分左右2叶，呈粉红色，有明显的腺体组织特征。
2. 用1 mL TB 针筒、29G针头轻轻挑起一侧前列腺包膜，缓慢进针，直至顶起对侧包膜，明确针尖进入包膜后，再缓慢推注Du145细胞悬液50 μL (6 ×106 个) ，以包膜向上鼓起,脱离腺体表面为满意标准。
3. 恢复脏器的解剖位置，用720可吸收线分别间断缝合腹壁肌肉层和皮肤层,待鼠苏醒后回笼。
4. 以裸鼠出现恶液质、处于濒死状态作为观察终点，颈椎脱臼法处死。
5. 尸解并观察荷瘤部位肿瘤的生长情况。
6. 裸鼠处死后，立即在100 mA，40 kV，5. 23 ms条件下行X线检查。
7. 裸鼠与球管距离为1. 0 m，然后取前列腺、膀胱、盆腔淋巴结、肝脏和肺脏标本， 40 g/L 甲醛固定、石蜡薄层切片4 μm， HE染色后光镜下观察有无转移灶。