白癜风动物模型

【建模背景】
动物模型是现代医药研究的重要基石，也是开展中医药现代研究的重要手段。动物模型的应用对中医病因病机的探讨、中药疗效与毒性的特点及机制研究、中医药理论的发展等都是至关重要的。如何建立与临床更相似的动物模型是开展相关研究的关键所在。
白癜风是一种获得性色素脱失皮肤病，发病人群以年轻人偏多， 易诊难治， 影响美观。目前白癜风的发病机制尚不明确， 可能与遗传因素、自身免疫、精神创伤、神经化学因子、黑素细胞自身破坏等因素有关。现白癜风动物模型为病理性动物模型， 以西医指标为主。基于对白癜风中西医临床病症特点分析及对现有动物模型大量实验研究， 形成如下白癜风动物模型，以期为该模型的相关研究提供参考。
【建模动物】
可用于制备白癜风模型的动物有豚鼠( 黑、灰、棕、黄色) ，C57BL 小鼠， Smyth line( SL) 鸡，狗和猫等，以豚鼠应用最多。常采用成年动物，雌雄各半。
【建模方法】

1. 氢醌脱色法制备豚鼠白癜风模型
   1. 原理 ：氢醌抑制酪氨酸酶（TYR) 催化酪氨酸转化为黑色素， TYR是黑色素合成的限速酶。也有认为氢醌脱色实质上是一种 TYR介导的细胞毒作用， 氢醌分子易扩散进入黑素细胞的黑素体， 阻断黑色素生成途径的一个或多个步骤。

1.2方法：体重 200 g 左右， 花黑色豚鼠， 雌雄各半， 背部脱毛， 脱毛面积约 4 cm × 4 cm， 脱毛后用生理盐水清洗脱毛局部， 局部脱毛区均无损伤。每
日在豚鼠脱毛区均涂 3% 氢醌甘油液 1 mL， 每天2 次， 上午和下午各 1 次 ( 每次 0. 5 mL， 每次先涂0. 25 mL， 10 min后再同量涂 1 次) ， 连续 50 d， 可制备豚鼠白癜风模型。在此期间， 各组豚鼠每 3 d 脱毛 1 次。本模型可持续 50 -60 d。

1. 过氧化氢脱色法制备豚鼠白癜风模型

2.1、原理：根据黑色素不稳定， 易受强氧化剂过氧化氢破坏的特性， 破坏皮肤黑色素， 使皮肤脱色，建立白癜风模型。
2.2、方法：体重 200 g 左右， 花黑色豚鼠， 雌雄各半， 背部脱毛， 脱毛面积约 4 cm × 4 cm。脱毛后用生理盐水清洗脱毛局部， 局部脱毛区均无损伤。在脱毛区涂 5% 过氧化氢溶液 1 mL， 每天2 次， 上午和下午各 1 次 ( 每次 0. 5 mL， 每次先涂0. 25 mL，10 min后再同量涂 1 次) ， 连续 50 d， 可制备豚鼠白癜风模型。在此期间， 各组豚鼠每 3 d 脱毛 1 次。本模型可持续 50 -60 d。
3、莫诺苯宗乳膏脱色法制备小鼠白癜风模型
3.1、原理：通过 TYR与活性氧自由基( ROS) 的相互作用， 引起系统性的自身免疫反应， 并作用于黑素细胞， 从而导致色素脱失， 与职业暴露性的白癜风无明显差异。
3.2、方法 ：C57BL /6 小鼠， 雄性 ( 雌性) ， 体重20 g左右， 脱去背部黑色毛， 脱毛面积约 2 cm ×2 cm， 脱毛后用生理盐水清洗脱毛局部， 局部脱毛区均无损伤。每天用刮勺稍用力涂抹 40% 莫诺苯宗乳膏 50 mg， 每天 1 次; 连续 50 d， 可制备小鼠白癜风模型。本模型可持续 50 -65 d。
【建模指标】

1. 表观指标：色素多少、色素面积大小、干燥脱屑情况等为白癜风的主要表观指标， 可对这些表观指标进行量化积分或半量化分级。白癜风动物模型制备成功后， 病变局部无色素， 皮肤呈苍白或白斑状， 干燥伴明显脱屑等。表观指标是临床白癜风的主要诊断依据， 也应是模型判定的依据， 权重系数 0. 5。
2. 病理指标：局部组织病理指标是高倍镜下观察含黑色素毛囊数、含黑素颗粒的细胞个数 。白癜风动物模型制备成功后局部组织形态观察， 可见棘层明显增厚， 角质层增生明显; 按 Lillie 硫酸亚铁染色法黑色素染色试剂盒说明书进行黑色素染色， 黑色素毛囊数显著降低; 高倍镜下随意观察基底细胞和棘层细胞颗粒， 可见有黑素颗粒的细胞个数显著减少。病理指标是白癜风动物模型病理变化的直接依据， 为直接相关指标， 权重系数 0. 3。
3. 生化指标：白癜风的发生与体内血清 TYR性密切相关， 与胆碱酯酶 ( CHE) ， 单 胺氧化酶( MAO) 活性， 丙二醛( MDA) ， 白细胞介素-6 ( IL-6)及肿瘤坏死因子-α( TNF-α) 含量等有一定关系。白癜风动物模型制备成功后， TYR 活性明显下降，CHE 和 MAO 活性升高， MDA， IL-6 和 TNF-α 的含量均增加。生化指标是白癜风动物模型发生、发展、康复过程的机体反映， 有一定价值， 但特异性不高， 权重系数 0.2。

【备注】
白癜风造模方法较多， 本文介绍的是与白癜风中西医临床病症特点吻合度较高且应用较多的动物模型。还有直接使用白癜风动物， 例如 SL 鸡、白癜风狗和猫等， 因存在价格昂贵、应用不便等问题， 致使应用不多。