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技术资料/正文

动物实验丨T迷宫-学习记忆的行为学研究方法

733 人阅读发布时间:2024-03-06 15:50

近半个世纪前,Kivy和Dember等人证明大鼠能辨别T-形迷宫(T-maze)两臂颜色的变化。他们发现,将雄性大鼠置于T-形迷宫的主干臂15~30min,让其能看见、但不能进入黑白两臂。然后,改变其中一个臂的颜色,使两臂同为黑色或白色。让大鼠自由选择T-形臂。结果显示,大鼠总是选择改变了颜色的那个臂(新异臂)。

这一过程要依靠动物的记忆来完成。由此发展而成的T-形迷宫实验成为目前用于评价空间记忆的最常用的动物模型之一。

一、用途

现在的T-形迷宫使用的是食物而不是臂的颜色作为动物探究的动力。通常用这一模型来研究动物的空间工作记忆(spatialworking memory),即测定动物只在当前操作期间有用的信息。

经改进后的T-形迷宫也可用来评价参考记忆(referencememory),即记录在这一实验中任何一天、任何一次的测试都有用的信息。

二、实验设备

迷宫由两个长46cm、宽10cm、高10cm的目标臂(goalarms)和一个与之垂直的长71cm、同样宽度和高度的主干臂(stem)或起始臂(approachalley)组成。

主干臂内置一个16cm*16cm的起始箱,并有一闸门与主干臂的另一部分相联。实验用雄性成年大鼠。饮水不限,但进食控制在每天16~20g,以使体重保持在非进食大鼠体重的85%。在整个训练和测试期间,大鼠体重每周增加不超过5g。

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图片:实验装置

三、实验方法

在这里,我们将介绍传统的T-形迷宫实验。

1、在传统T-形迷宫实验中,首先需要让大鼠适应迷宫的环境。具体操作是在T-形迷宫的臂内放置6粒食丸(45g),并将大鼠放入起始箱中,让大鼠在迷宫中自由活动5分钟,每天一次,连续5天。

2、接着进行强迫选择训练。将大鼠放入主干臂的起始箱,打开闸门,让大鼠进入迷宫的主干臂。然后随机选择左右两臂之一,并在其中放入4粒食丸,同时关闭另一臂,从而迫使动物选择食物强化臂并完成摄食。每天进行6次训练,连续训练4天。

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图片:实验装置

3、最后进行延迟位置匹配(DMP)训练。具体步骤如下:

1.将动物放入闸门关闭的起始箱,打开闸门,让动物进入主干臂。

2.关闭一侧目标臂,强迫动物进入另一侧开放臂以获得2粒食丸奖赏。

3.一旦动物完成选择,立即将其放回主干臂,开始匹配训练中的第二次训练。此时两个目标臂均开放。动物将两前肢和至少两后肢的一部分置于一个目标臂时完成“一次选择”。如果动物返回到强迫选择训练时进入过的臂,则获得食物奖赏(4粒食丸),记录一次正确选择;如果动物进入另一臂,则没有食物奖赏,并且将其限制在该臂内10秒,记录一次错误选择。

4.一次匹配训练结束后将动物放回笼内5~10分钟(与此同时训练其他动物),再重复下一次匹配训练。每天进行8次训练。

如果动物连续两天的正确选择次数达到15/16,则认为其已经达到标准,可以进行实验。如果动物经过30天的训练仍然无法达到标准,则予以淘汰。

四、注意事项

1、大鼠和小鼠具有良好的空间辨别功能,能很快学会并准确操作迷宫。因此,T-形迷宫和放射臂迷宫均被广泛用于测试动物的空间记忆能力。T-形迷宫用于研究不同脑区对空间记忆的影响。它对某些脑结构,尤其是海马的毁损作用敏感。此外,许多药物或毒素都可增强或削弱动物在T-形迷宫的空间记忆。实验所用的动物除大鼠和小鼠外,还包括猪、羊、乌龟和鸽子等。

2、动物选择的准确性与两次选择之间的间隔及每一训练间期内的选择训练次数等有关。正常动物经短时间的间隔(例如5s),其选择准确性非常高。而经过极长时间的间隔(例如超过1h),其选择接近随机性操作。强迫选择训练后。如只给一次目标臂选择,准确性通常很高。但是,如给予多次选择,则选择次数越多,准确性越差。

3、啮齿类动物有单向偏爱的特性。这种单向偏爱与动物种属和品系有关。例如,C57BL/6J小鼠、ICR小鼠和Purdue-Wistar大鼠更偏爱左侧,而Spague-Dawley大鼠和Wistar大鼠更偏爱右侧。研究表明,超过2/3的雄性Spague-Dawley大鼠偏爱右侧,而偏爱左侧的不到1/5。这种单向偏爱可影响对动物学习记忆的评价。

4、主干臂的闸门是T-形迷宫的重要特征。它既可用于在两次选择之间将动物限制在起始箱内一定的时间,也可防止动物在两次选择训练之间探究迷宫。因此,两次选择训练之间应将动物迅速放回主干臂内的起始箱。这一点很重要,它可确保动物不会去探究对侧目标臂。

资料格式:

T迷宫.jpg

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