特殊染色丨阿利新蓝染色

阿利新蓝是一种类铜钛花青共轭染料，与组织中的阴离子基团结合形成不溶性复合物。阿利新蓝由中央含铜的酞菁环和四个异硫脲基通过硫醚键相连而成，具有阳离子性质。

阿利新蓝的染色特性可通过调整染液的pH值区分粘液物质的类别。在pH值2.5时，带有负电荷的组织内羧基与阿利新蓝中的阳离子形成盐键，使带有羧基的组织（如蛋白多糖/透明质酸和上皮酸性黏蛋白）染色。

而在pH值1.0时，带有负电荷的组织内硫酸根与阿利新蓝中的阳离子形成盐键，使带有硫酸根的组织（如硫酸黏液物质）染色。

然而，不含有与阿利新蓝结合的阴离子基团的中性黏蛋白（如胃黏膜和Brunner腺体部位的中性黏蛋白）无法与阿利新蓝发生反应。

阿利新蓝染色法对于进一步鉴别各类血细胞，提高对急性早幼粒细胞白血病的诊断具有重要意义。

1、脱蜡至水：将蜡包埋的切片依次放入二甲苯 I、二甲苯 II、二甲苯 III 中，每个步骤持续 5 分钟。然后将切片放入无水乙醇中浸泡 1 分钟，接着放入 95% 酒精和 75% 酒精中各浸泡 1 分钟。最后，用自来水冲洗数秒。

2、Alcian 酸化液：滴加 Alcian 酸化液到切片上，保持 3 分钟。

3、阿利新蓝染液：使用 1% 的阿利新蓝染液，将切片在室温下染色 30 分钟，或者在 37°C 下染色 15 分钟。

4、核固红复染：将核固红复染剂滴加到切片上，保持 5-10 分钟。

5、乙醇脱水：将切片依次放入两次 95% 乙醇中，每次大于 2 分钟。

6、无水乙醇浸泡：将切片依次放入两次无水乙醇中，每次大于 2 分钟。

7、二甲苯浸泡：将切片依次放入两次二甲苯中，每次大于 2 分钟。最后，使用中性树胶进行封固。

阿利新兰染色实例

1、在染色前，使用10%中性福尔马林作为固定液来处理样本。固定液的目的是固定细胞和组织的结构，以便后续的染色和观察。

2、如果需要选择性地鉴别硫酸黏蛋白和蛋白多糖，应使用pH值低的阿利新蓝。将染液的pH值调整为1.0，以实现对硫酸黏蛋白的染色。使用pH值为1.0的阿利新蓝进行染色时，染色程序和孵育时间与pH值为2.5的阿利新蓝操作相同。但是，由于pH值不同，染色时间应相应延长，以确保充分染色。

参考文献：

[1]脑脊液阿立新兰染色在隐球菌脑膜炎诊断中的价值 [J] . 樊新红 ,王丽 ,崔长富 . 吉林医学 . 2014,第020期

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[3]阿利新兰(Alcian blue)染色在急性白血病诊断中的价值 [J] . 李顺义 ,李玉秀 ,殷玉敏 . 河北医科大学学报 . 1983,第001期