特殊染色丨LFB髓鞘染色

LFB是一种铜-酞篝染料，具有与髓鞘磷脂结合的染色特性。通过应用LFB髓鞘染色，可以很好地显示神经组织中的髓鞘结构。包括髓鞘的厚度、连续性和分布情况。这对于研究神经系统的发育、变性、再生以及相关疾病如多发性硬化症等具有重要意义。

1、石蜡切片脱蜡至水：将切片依次放入二甲苯中浸泡20分钟，然后再放入第二个二甲苯中浸泡20分钟。接下来，将切片放入无水乙醇中浸泡10分钟，然后放入第二个无水乙醇中浸泡10分钟。继续将切片依次放入95%、90%、80%和70%酒精中，每个浓度的酒精浸泡5分钟。最后，用蒸馏水进行洗涤。

2、染色：将切片放入0.1% LFB染液中，在60°C下孵育过夜。随后，用自来水冲洗。

3、分化：将切片放入70%乙醇中（无固定时间）。然后，将切片浸入0.05%碳酸锂中，在显微镜下控制分色时间，直到满意的分色效果（可见灰质部分颜色变淡）。如果分化效果不好，可以交替进行这两个步骤几次，直到满意为止。最后，用水进行洗涤。

4、伊红复染：将切片放入0.1%伊红复染液中，浸泡1分钟，然后用水洗涤。

5、封片：使用电吹风或烘箱将切片吹干。然后，用二甲苯逐渐透明化数分钟，最后使用中性树胶封片。

1、在使用0.05%碳酸锂水溶液进行分色时，应该在显微镜下观察，直到背景呈灰色为止。而在使用70%酒精进行再次分色时，应该分到背景无色为止。

2、在LFB染色完成后，可以使用焦油紫溶液或苏木素-伊红复染，这样可以更好地显示细胞的形态。在进行复染之后，可以使用正丁醇进行漂洗脱水，这样可以获得更好的染色效果。

参考文献：

[1]两种髓鞘染色方法在Cuprizone诱导脱髓鞘小鼠模型中的比较 [J] . 张丽 ,尹琳琳 ,李林 . 首都医科大学学报 . 2012,第006期

[2]抗酸染色后不同复染方法的比较 [J] . 云洪岩 ,董愉 ,李冰 . 中国组织化学与细胞化学杂志 . 2021,第003期

[3]两种不同染色方法对慢性阻塞性肺病大鼠模型的染色观察 [J] . 贺芳2 ,梁景长2 ,李俊玲12 . 生物技术世界 . 2015,第011期

[4]Myelin Detection Using Rapid Quantitative MR Imaging Correlated to Macroscopically Registered Luxol Fast Blue-Stained Brain Specimens [J] . Warntjes J. B. M., Persson A., Berge J., AJNR. American journal of neuroradiology . 2017,第6期